大肠杆菌表达系统是使用很广泛的蛋白质表达系统，拥有遗传背景清楚、表达水平高、操作简单、培养周期短等优点，市售的大约30%的重组蛋白产品都是由大肠杆菌系统生产而来。

应用大肠杆菌表达系统时，为了得到符合科研和产业需求的重组蛋白目标产物，往往需要进行目标蛋白基因或菌种的突变，进行大量且繁琐的表达菌种和高表达蛋白突变体的筛选工作。大肠杆菌作为宿主菌，表达的蛋白定位为胞内、胞外和周质腔三种。为获得胞内蛋白或周质腔蛋白，往往需要对大肠杆菌进行破碎。虽然胞外蛋白可以借助信号肽的引导分泌到胞外，但蛋白的分泌效率通常不高，且很多时候，发酵中后期目标蛋白才开始运输到胞外，导致绝大多数蛋白仍储存在胞内，所以在进行蛋白制备时，为提高蛋白收率，仍需要进行细胞破碎。因此，破碎细胞是高通量筛选大肠杆菌菌种时必不可少的环节。

目前常用的破碎细胞的方法有超声、均质机压力、溶菌酶、反复冷冻、化学试剂等，但是这些方法不同程度存在破碎效率低、成本高、周期长、细胞破碎不均一等的缺点。赛尔瑞成开发的大肠杆菌专用破菌液，能够高效、简便的对大肠杆菌进行细胞破碎，特别适用于需要细胞破碎的高通量筛选。

 

 

★ 产品优势

1. 原位破菌，使用便捷，筛选成本更低
原位收集菌体，原位破菌，高通量操作。适用于各种型号培养板（如96孔板、48孔板、6孔板等），节省仪器成本、人力成本，节约时间，方便操作。

 

2. 组成成分温和
不含还原剂、强变性剂、离子型去污剂等烈性成分，对绝大多数蛋白结构和活性无影响。

 

★ 使用方法

1. 按常规方法，在培养板（如96孔板、48孔板、24孔板等）中接种培养大肠杆菌，至蛋白表达完成，即可使用孔板离心机离心收菌，弃去上清，尽量去除干净；

2. 只需将孔板中收集的菌体按照孔板体积的五分之一左右加入破菌液，简单混匀，置于-20°C以下冰箱，待完全冷冻结实。需要破菌时取出室温自然解冻充分，然后按常规方法高速冷冻离心，收取破菌上清和菌体沉淀。